本文標(biāo)題："動(dòng)物胚胎顯微分割的方法簡(jiǎn)介-立體圖像顯微鏡"

動(dòng)物胚胎顯微分割的方法簡(jiǎn)介-立體圖像顯微鏡

分割方法

    胚胎分割可分為顯微操作儀分割和徒手分割兩種。

1.顯微操作儀分割使用顯微操作儀切割胚胎時(shí)，可根據(jù)習(xí)慣
將胚胎固定吸管安裝于操作臺(tái)左側(cè)器械支架上，
切割刀或切割針安裝于右側(cè)。通過(guò)顯微鏡觀察胚胎，調(diào)節(jié)機(jī)械
手粗調(diào)，使操作器接近胚胎并處于最適操作角度;再調(diào)節(jié)顯微注射器負(fù)壓，
使固定吸管吸住欲分割的胚胎以作固定;通過(guò)操作手柄將胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)從
中央切開(kāi)。
采用切割針切割時(shí)，通過(guò)操作手柄把針的切割部置于胚胎正上方適當(dāng)施壓，
當(dāng)針接觸到皿底時(shí)，稍加來(lái)回抽動(dòng)，即可使胚胎一分為二。

    如果分割后的胚胎需要裝人透明帶，為節(jié)省透明帶和簡(jiǎn)化操作，不要把
被切割胚胎的透明帶切成兩半，可只作一切口，吸出半個(gè)胚胎，使原有透明
帶留一半胚胎。另一半重新裝帶或用瓊脂封固即可移植。

    2.徒手分割該法由內(nèi)蒙古畜牧科學(xué)研究所首創(chuàng)。在90mm塑料培養(yǎng)皿內(nèi)，
做數(shù)個(gè)100μL，培養(yǎng)液微滴，咒于實(shí)體顯微鏡載物臺(tái)上，移一枚胚胎人液滴，
用右手拇指和食指捏好刀片，角度以能接觸皿底為宜，先用刀片在含有胚胎
的液滴平皿底部輕輕劃一痕，把胚胎撥移至痕跡線上，刀刃在胚胎中部由
上至下將胚胎一分為二，再用吸管吸取兩枚半胚洗凈后裝管移植。

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