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本文標題："蛋白質的碘化作用與大的蛋白質分子的順序測定"

發布者：yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間：2016-9-26 13:37:19

蛋白質的碘化作用與大的蛋白質分子的順序測定

　　大的蛋白質分子的順序測定會提出許多問題，但其測定方法基本

上是與測定這個十肽的方法一樣的。將蛋白質先用胰蛋白酶和胰凝乳蛋

白酶分裂成較小的、容易確定的肽。然后利用某些取決于肽的電荷豹技

術將這些肽分離。這類技術包括電泳，在電泳時帶電荷的樣品在電場中

移動，移動速度取決于分子的電荷和大小；還有離子交換層析法，該法

是依靠在不同情況下，樣品與帶有電荷的離子交換樹脂結合力的不同來

分離肽。然后找出各肽的詳細順序。采取利用兩種酶提供的“重疊法”

，就可以弄清楚蛋白質的一級順序。某些試劑可用來測定很大的蛋白質

的結構，這些試劑可在一定的氨基酸殘基處專一性地切斷鍵，如溴化氰

可以在甲硫氨酸殘基之后的地方切斷。蛋白質通過這種斷裂首先變成比

較容易處理的肽。含有數百個氨基酸的蛋白質的結構都可以用這種方法

搞清楚。

　　同樣，如果酪氨酸是活性中心的殘基，那么蛋白質的碘化作用就可

以引起活力的喪失，可用FDNB處理來證明活性中心的賴氨酸、組氨酸和

酪氨酸殘基。這些方法沒有一個是對鑒定活性中心殘基絕對專一和具有

結論性的。不過將各種方法結合使用，再參考從動力學研究得到的證據

，很多酶的活性中心的性質是可以測定出來的。

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