要在生物體外大量制作單株抗體，就必須先將專門分泌抗體的B細胞移殖到培養(yǎng)皿上，不幸的是，大部分的B細胞一離開生物體就會死亡，無法在生物體外繁殖，連B細胞都養(yǎng)不活了，那能指望B細胞分泌抗體呢？后來科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，世界上只有一種細胞生命力強盛，不管移殖到那里都能活的好好的，那就是「癌細胞」，癌細胞是不正常且快速生長的細胞，可以在培養(yǎng)基(一種含有養(yǎng)份的液體)中大量繁殖，如果將B細胞可以分泌抗體的特性與癌細胞生命力強盛的特性結(jié)合起來，就可以在培養(yǎng)皿上大量制作單株抗體了。

 

單株抗體的制作方法是先將B細胞與骨髓癌細胞融合成一個細胞，稱為「融合瘤」，如**圖16-7(a)所示，在融合的過程中B細胞與癌細胞的基因會重組，所以融合瘤含有B細胞與癌細胞基因重組后的染色體，同時具有B細胞與癌細胞的特性，可以分泌抗體，又可以在培養(yǎng)皿中大量繁殖。融合瘤的制作流程如下：

＞PEG細胞融合

將抗原(病毒)注入小白鼠體內(nèi)，再取出脾臟(含有大量的B細胞)，并且將脾臟細胞與癌細胞混合，加入PEG試劑進行細胞融合，PEG試劑是一種化學(xué)藥品，會將B細胞與癌細胞的細胞膜分解，讓B細胞與癌細胞結(jié)合成一個融合瘤。

＞HAT篩選(Hypoxanthine、Aminopterine、Thymidine) 

將融合瘤以HAT培養(yǎng)基(一種含有化學(xué)藥品的液體)來培養(yǎng)，由于B細胞不容易在生物體外生長，因此會自然死亡；癌細胞雖然很容易在生物體外生長，但是會被HAT培養(yǎng)基殺死；最后只有B細胞與癌細胞結(jié)合形成的融合瘤存活下來，如圖16-7(b)與(c)所示。

＞ELISA篩選(Enzyme Linked Immunosorbent Assay) 

并非所有的B細胞都會產(chǎn)生我們所要的抗體，小白鼠原先就存在許多B細胞分泌抗體對抗其他疾病，因此必須使用酵素免疫分析法(ELISA)篩選出我們所要的抗體。

＞融合瘤單株化

接著將融合瘤，先稀釋分配到96個培養(yǎng)皿中，再以酵素免疫分析法(ELISA)篩選而得到「單株的融合瘤」。

＞產(chǎn)生抗體

將單株的融合瘤注入小白鼠腹部，再取出腹水，腹水內(nèi)就會含有大量的「單株抗體」。